Einer der weltweit führenden Hersteller von Wellenanalysatoren und adaptiver Optik, das französische Unternehmen Imagine Optic, hat ein spezielles Modul namens MicAO 3DSR mit adaptiver Optik entwickelt, genauer gesagt mit dem Shack-Hartmann-Sensor HASO4 First und dem verformbaren Spiegel Mirao 52e, um die Qualität von Einzelmolekül-Methoden in allen drei Dimensionen um bis zu 40 % zu steigern. Das MicAO 3DSR-Modul ist in der Lage, Astigmatismus und Aberrationen des optischen Systems zu korrigieren, was die Detektion einer größeren Anzahl von Photonen aus der Probe ermöglicht und somit zu einer Erhöhung der Auflösungs- und Lokalisierungsgenauigkeit bei superauflösenden Lokalisierungsmethoden (PALM, STORM, SPT) bei.
Zu den wichtigsten Eigenschaften dieses Moduls gehören:
- beste 3D-Lokalisierungsgenauigkeit
- Verdopplung der Anzahl der detektierten Photonen
- Korrektur sphärischer Aberrationen des optischen Systems
- Kontrolle der Streufunktion (PSF) des optischen Systems und Wiederherstellung der axialen Symmetrie der PSF
- Kompatibilität mit 60X- und 100X-Objektiven sowie dem Sichtfeld der meisten sCMOS-Kameras
- Möglichkeit zur Durchführung von Einzelmolekül-Bildgebung in tieferen Schichten (bis zu 50 µm) von Proben auf Wasserbasis
- Wellenanalysator, der länger als 12 Stunden stabil bleibt
- Reproduzierbarkeit der PSF
Dieses Modul wurde für die einfache Integration injedes inverses Mikroskop entwickelt, wobei das Gerät einfach zwischen den seitlichen Anschluss des Mikroskops und die Aufnahmekamera eingesetzt wird. MicAO 3DSR wird zusammen mit der benutzerfreundlichen Software MicAO v1.3 geliefert, die alle notwendigen Werkzeuge zur Erkennung und Korrektur von Aberrationen in biologischen Proben enthält.
Verbesserung der Punktverteilungsfunktion (PSF) mithilfe des MicAO 3DSR-Moduls mit adaptiver Optik. Links: PSF ohne Einsatz von MicAO 3DSR, rechts: PSF nach Korrektur mit MicAO 3DSR. Mittleres Feld: Vergleich der Fluoreszenzintensitätsprofile. Maßstab: 200 nm.