TIRF = Total Internal Reflection Fluoreszenz, auch als Total-Internal-Reflection-Fluoreszenz (TIRF) bezeichnet, ist ein mikroskopisches Verfahren, bei dem die Totalreflexion des Anregungsstrahls an der Grenzfläche zwischen zwei Medien mit unterschiedlichen Brechungsindizes genutzt wird. Diese Methode basiert auf der Unterdrückung der Hintergrundfluoreszenz, indem die Fluoreszenz aus der Fokusebene abgelenkt wird, wodurch das Signal-Rausch-Verhältnis erhöht und die Ebenen in der Probe besser unterschieden werden können. Durch die Reflexion des Lichts an der Grenzfläche entsteht ein sehr dünnes elektromagnetisches Feld (sog. evaneszente Welle), das dieselbe Frequenz wie die einfallende Strahlung aufweist. Evaneszenz-Wellen werden zur Anregung einer dünnen Probenschicht (weniger als 200 nm) und zum Nachweis von Fluorophoren in diesen dünnen Schichten genutzt.
