Kompaktes Konfokalmikroskop Andor BC43 CF

Konfokalmikroskop Andor BC43

Klein in der Größe, groß in der Leistung – so präsentiert sich das neue Plug&Play-Konfokalmikroskop der Firma ANDOR, das sich sowohl für angehende Forscher als auch für erfahrene Mikroskopiker eignet!

Dank seiner kompakten Abmessungen (505 x 633 x 443 mm – B x T x H) passt das BC43 CF auch in kleine Arbeitsbereiche, ein weiterer Vorteil ist das durchdachte Design mit einer leichten, dichten und undurchsichtigen Abdeckung sowie einer integrierten Antivibrationsplatte, sodass weder eine Dunkelkammer noch ein separater Objekttisch erforderlich sind.

Weniger Zeit für die Einarbeitung, mehr Zeit für die Bildgebung!

Das BC43 CF ist ein intuitives Mikroskop, das dank einfacher Bedienungsabläufe und minimalem Wartungsaufwand auch von wissenschaftlichen Einsteigern leicht zu bedienen ist!

Hardware:

• Hochgeschwindigkeits- Konfokalaufnahme zur Erfassung dynamischer Vorgänge in dickeren Proben
• Weitfeld-Modus für lichtempfindliche Proben und zur Erkennung selbst schwächster Signale
• Flexibilität bei der Bildgebung, Möglichkeit der Kombination mehrerer Bildgebungsmodalitäten in einem Protokoll
• Kompaktes Tischgerät mit undurchsichtiger, dunkler Abdeckung (kein Dunkelraum erforderlich) und integriertem Antivibrationsmechanismus
• Motorisiertes Objektivkarussell mit 5 Positionen
• Effiziente Navigation, Positionierung und Fokussierung auf die Probe mit einstellbarer Navigations- und Fokussiergeschwindigkeit mittels eines ergonomischen 3D-Joysticks
• Patentiertes Beleuchtungssystem Borealis für konfokale und Weitfeld-Aufnahmen, das eine gleichmäßige Ausleuchtung des gesamten Sichtfelds und eine höhere Durchlässigkeit des Lichtstrahls gewährleistet
• Hochempfindlicher Detektor für kurze Belichtungszeiten und zur Reduzierung des Photobleachings, der einen hohen Dynamikbereich bietet, um sowohl schwache als auch helle Signale in einem Bild ohne Sättigung zu erfassen

Software:

• Ergänzende Steuerungs- Software Fusion mit einem Modul zur Dekonvolution ClearView-GPU (bis zu 50-fache Beschleunigung über die GPU), das für eine Erhöhung der Auflösung und des Kontrasts der Aufnahme sowie eine Verbesserung der Gesamtbildqualität sorgt
• Einfacher Arbeitsablauf vom Einlegen der Probe bis zur Aufnahme – einfach die Probe einlegen, den Punkt von Interesse finden, die Grenzen festlegen und mit einem einzigen Klick die Aufnahme erstellen. Es sind keine langwierigen Schulungen und keine Vorkenntnisse erforderlich.
• Die patentierte Focus Seek & Lock-Technologie zur Verbesserung der Fokussierung der Probe auch bei längeren Zeitraffer-Experimenten
• Funktion zur mehrdimensionalen Darstellung zur Visualisierung der gesamten Probe – gleichzeitige Erstellung von Zeitbildern, Z-Stacks und Kachelpositionen
• Erfasst automatisch Daten großer Proben (die größer als das Sichtfeld sind) und fügt sie für ein vollständiges Bild zu 2D- und 3D-Montagen zusammen
• Ermöglicht Multiwell-Imaging – bildet 6-, 12-, 24- und 96-Well-Kulturplatten ab
• Die 3D-Bildgebung der Daten in Echtzeit liefert sofortiges visuelles Feedback zum Verlauf des Experiments zur Auswertung und Visualisierung der Daten in Echtzeit
• Basis-Softwarepaket Imaris zur Visualisierung und umfassenden Analyse von 2D/3D/4D-Mikroskopiedaten im Umfang von mehreren hundert GB, Erweiterungsmöglichkeit um an spezifische Anwendungen angepasste Module

Zebrafischflosse während der Knochenregeneration. Das Bild zeigt die perfekte Zusammenfügung von 4 Bildfeldern unter Verwendung von drei Kanälen und 51 Stapeln pro Feld, die einen Z-Bereich von 174 μm abdecken. Neu gebildetes Knochengewebe ist violett dargestellt (Calcein-Färbung), Cathepsin-K+-Zellen (die Osteoklasten) gelb und die DNA cyanfarben. Bildnachweis: Alessio Carletti, Universidade do Algarve

Hauptmikroskopeinheit:

• Bildgebungsmodi: Spinning-Disk-Konfokalmikroskopie, Epifluoreszenz-Weitfeld, Durchlicht – Hellfeld und differentieller Phasenkontrast
• Bildgebungsverfahren: Einfarben, Mehrfarben, Z-Stacks, Zeitraffer, Multiposition, Multiwell, Montage und 2D/3D-Stitching
• ClearView GPU: entfernt unspezifische Hintergrundsignale der Probe und verbessert die Auflösung über die normalen optischen Grenzen hinaus

Kamera:

• Auflösung: 6,5 μm Pixel; 2048 x 2000 Pixel (4,1 MPx)
• Quantenausbeute: bis zu 82 %
• Sichtfeld (FOV): 18,4 mm diagonal
• Kühlung: 0 °C
• Bilder: monochrom, 16 Bit

Beleuchtung:

• Fluoreszenzquelle: 4 feste Wellenlängen 405 nm, 488 nm, 561 nm, 638 nm
• Durchlicht: Breitband-LED

Optik:

• Motorisierter Objektivrevolver für 5 Objektive
• Objektivvergrößerung: Im Lieferumfang des Mikroskops ist stets ein Objektiv mit 2-facher Vergrößerung enthalten, um die Orientierung auf der Probe zu erleichtern. Die übrigen 4 Positionen können je nach Auswahl und Anforderungen mit Objektiven bestückt werden
• Emissionsfiltersatz zur Darstellung gängiger Fluorophore (DAPI, Alexa 488/GFP, Alexa 546/mCherry/TRITC, Cy5/Alexa Fluor 640)
• Motorisierter XY-Tisch: Positionierbereich 110 × 80 mm; Auflösung 100 nm
• Z-Control & Focus: Bereich 14,5 mm
• Seek & Lock-Technologie: automatisches Auffinden der Fokusebene und Aufrechterhaltung der Fokusstabilität bei Zeitraffer-Experimenten
• Probenhalter: Standard-Objektträger (25 × 75 mm), Kulturgefäße (Durchmesser 35 mm), Mehrfach-Kulturplatten (6, 12, 24 und 96), Deckgläser für Mehrfachkammern (2, 4, 8)
• Inkubator (optional): Auf dem Objekttisch montiert, verschiebbarer Deckel für einfachen Zugang und Probenwechsel, Heizung für Ölimmersionsobjektive

Arbeitsstation:

• PC: Windows™ 10-Software, 64 GB DDR4-RAM, 512 GB PCIe-SSD-Bootlaufwerk, 4 GB Grafikkarte, 2 TB Speicherplatz für Bilddaten

Aufnahme eines Plattfischs, aufgenommen mit dem Andor Bench Top Confocal BC 43 unter Verwendung der Mehrkachel-Aufnahme und -Montage. Zur Erstellung des Bildes wurden 6 Kacheln aufgenommen, die einen Bereich von 554 µm abdecken. Das Bild wurde mit Imaris gerendert. Bildnachweis: Marco Campinho, Universität der Algarve, und Claudia Florindo, Andor Technology.

Drosophila-Eikammer. Das Bild ist eine Maximum-Intensity-Projektion von 309 Z-Ebenen, die einen Bereich von 93 µm abdecken. Das Bild wurde mit ClearView dekonvolviert und in Imaris gerendert. (Gelb: DNA, Cyan: Aktin). Bildnachweis: Rui Silva, Universität der Algarve, und Claudia Florindo, Andor Technology.

Dieser unverletzte Finger eines erwachsenen Tieres (12 Wochen alte Maus) stammt von einem transgenen Tier (Dmp1 Cre ERT), das mit einem TdTomato-Reporter gekreuzt wurde. Das magentafarbene Signal korreliert mit dem TdTomato-Reporter, der Zellen der Knochenlinie (Dmp1-positiv) markiert, während das „Cyan“ eine einfache Hoechst-Färbung darstellt. Bildnachweis: Dr. Mekayla Storer, SickKids, Toronto, Kanada.

Zur Aufnahme eines Drosophila-Embryos im Frühstadium wurde die konfokale Bildgebungsmodalität des Andor Benchtop Confocal BC43 verwendet. Das aus diesem Experiment stammende Bild ist das Ergebnis der Zusammenfügung von 6 Bildfeldern über einen Z-Bereich von 40 µm. Mikrotubuli sind blau, Zentrosomen gelb und die DNA magenta markiert. Bildnachweis: Ines Baião-Santos und Álvaro Tavares, Universität der Algarve, Claudia Florindo, Andor Technology.

Mit GFP und mCherry markierte Membranmarker, die in Speicheldrüsenzellen von Drosophila exprimiert werden. Bildnachweis: Cheng-I Jonathan Ma und Julie Brill, Programm für Zellbiologie, The Hospital for Sick Children.

Die Entwicklung eines Drosophila-Embryos lässt sich mithilfe des konfokalen Bildgebungsmodus des BC43 mühelos in 3D mit bis zu 4 Kanälen visualisieren. Bildnachweis: Ines Baião-Santos und Álvaro Tavares, Universität der Algarve, Claudia Florindo, Andor Technology.

Hühnerembryo im Stadium HH15/16, gefärbt mit DAPI. In diesem Entwicklungsstadium sind die Chorda, der Neuralrohr und die Somiten deutlich zu erkennen. Bildnachweis: Tomás Azevedo, Universität der Algarve, und Claudia Florindo, Andor Technology

Mit einem neuronalen Marker gefärbte Drosophila-Embryonen wurden für eine Mehrpositions-/Montageaufnahme vorbereitet. Dieses ausgewählte Bild ist eine Montage eines 3×3-Feldes an der ausgewählten Position mit 101 z-Schnitten, die einen Bereich von 50 µm abdecken. Bildnachweis: Álvaro Tavares, Universität der Algarve, und Claudia Florindo, Andor Technology.

Dieses Bild ist eine einzelne 3D-Ansicht aus einem Zeitrafferexperiment – die Zellteilung lässt sich im gesamten sich entwickelnden Drosophila-Embryo deutlich beobachten. Die DNA ist in Magenta dargestellt, die Mikrotubuli in Cyan. Bildnachweis: Ines Baião-Santos und Álvaro Tavares, Universität der Algarve, Claudia Florindo, Andor Technology.

Integrierte Software

Im BC43 CF ist eine ergänzende Software zur Steuerung und grundlegenden Verarbeitung von Bilddaten integriert – FUSION, die in wenigen einfachen Schritten eine erstklassige Bildgebung ermöglicht. Die Vorteile der Fusion-Software sind vor allem:

• 3D-Visualisierung der Daten in Echtzeit während der Aufnahme
• Benutzerfreundliche Oberfläche mit intuitiver Bedienung
• Einfache Einrichtung von Protokollen für mehrdimensionale Experimente
• Datenverarbeitung nach der Erfassung – Stitching und Dekonvolution, beschleunigt durch die GPU (ClearView-GPU)
• Automatische Aufnahme von Bildern großer Proben (die größer als das Sichtfeld sind) und Stitching zu 2D- und 3D-Montagen für ein vollständiges Bild der Probe
• Patentierte Autofokus-Technologie „Focus Seek & Lock“ – zur Vereinfachung der Fokussierung auf Proben und zur Aufrechterhaltung der Schärfe bei langen Zeitrafferaufnahmen und der Erfassung großer Proben

Das Herzstück des BC43 CF ist zudem ein Basis-Softwarepaket zur Visualisierung und Analyse mikroskopischer Daten – IMARIS, das durch das gemeinsame Datenformat *.ims an Fusion anknüpft und so den Übergang zwischen der Erfassung und der Analyse von Bilddaten beschleunigt und vereinfacht. Die Imaris-Software ermöglicht es den Anwendern:

• Ihre Mikroskopaufnahmen einfach und schnell in 2D/3D/4D zu visualisieren
• Isoflächen-Rekonstruktionen zur besseren Interpretation und Präsentation von Rohdaten zu erstellen
• Einfach hochauflösende Bilder und mehrdimensionale Videosequenzen zu erstellen

Das Imaris-Basispaket kann um weitere spezifische Module für konkrete Anwendungen ergänzt werden, um so die Analysemöglichkeiten zu erweitern, z. B. Imaris für Zellbiologie, für Neurowissenschaften usw.

Säugetierzelle in der Prophase. Das Bild wurde im BC43-Konfokalmodus mit 4 Erfassungskanälen und einem Z-Bereich von 10 μm bei Nyquist aufgenommen. Das Bild wurde anschließend in Imaris dekonvolviert und gerendert. Dunkelblau – Aktin, Gelb – Mikrotubuli, Magenta – Mitochondrien, Cyan – DNA. Bildnachweis: Claudia Florindo, Andor Technology.