SDCM – Mikroskopie organoidů

Prostorové buněčné kultury pluripotentních kmenových buněk umožňují formaci „organoidů“. Jsou to komplexní buněčné struktury, které se podobají orgánům a poskytují nové příležitosti pro testování léků, zhodnocení tkáňové regenerace a pozorování dalších in vivo biologických procesů (genové mutace, vývoj a poškození orgánů, rakovinné bujení). Myší a lidské kmenové buňky byly použity ke tvorbě mnoha typů organoidů, které slouží jako model střevního epitelu, jaterní tkáně a mozku.
Potenciální využití organoidů demonstruje studie, při které byly izolovány buňky z kolorektálních karcinomů (CRC) od reálných pacientů. Organoidy, které vznikly z těchto CRC buněk vykazovaly v několika vlastnostech vysokou míru podobnosti s původními CRC, což umožnilo přímé testování potenciálních protinádorových léků. Organoidy od různých pacientů byly namnoženy a seřazeny do tzv. biobanky, která slouží jako zdroj pro další analýzu. Je možné zjistit například vztah mezi určitými léčivy a genetickým materiálem konkrétního organoidu. Další vývoj této aplikace povede k získání metod pro personalizovanou léčbu různých druhů rakoviny. Zároveň díky své komplexitě organoidy zaplní mezeru mezi in vitro výzkumem nových léčiv na 2D buněčných kulturách a klinickými studiemi.

Máte zájem o tuto aplikaci? Potřebujete radu?

Kontaktujte nás

Jedna z důležitých metod pro analýzu těchto buněčných struktur je mikroskopie. Vzhledem k různorodosti organoidů je nutné, aby použitý mikroskop poskytoval dostatečnou flexibilitu. Jedná se o zobrazování živých buněk (live cell imaging), proto je rovněž kladen důraz na redukci toxických účinků světla a vysvěcování fluoroforů (bleaching). Navíc je vzhledem k rozměrům těchto prostorových buněčných kultur požadovaná vysoká rychlost snímání a dostatečná penetrační hloubka (Andor, 2016).

Konfokální mikroskop Dragonfly splňuje všechny předpoklady pro zobrazování organoidů:

Flexibilita konfokálního snímání – zoom optika u kamer, dvě velikosti pinhole na disku (SDCM)
Vysoká rychlost snímání – 103 snímků za sekundu (2048 × 2048 pixel) – sCMOS kamera Zyla 4.2 Plus
Nízké intenzity osvětlení – extrémně citlivé kamery (QE > 90 %) – EM CCD kamera iXon Ultra 888
„Multimodální“ zobrazování – konfokální mikroskopie, widefield mikroskopie, TIRF mikroskopie

Cell Press Selection – Organoids

Soubor nejdůležitějších recentních vědeckých článků na téma Organoidy publikovaných v magazínu Cell
Engineering Stem Cell Organoids
Complex Tissue and Disease Modeling using hiPSCs
Modeling Development and Disease with Organoids
a mnoho dalších
Pro stáhnutí vyplňte prosím krátký formulář, který se objeví při kliknutí na obrázek: